NORMAS DE FUNCIONAMIENTO

Horario de recepción y entrega.

 

10-11 h - 13:30-14:30 h

 

Reservas de equipos.

 

- La reserva de los equipos localizados se hará de forma formal entrando en  Intranet-Reservas-Aparatos. Además se deberán cumplir las reglas establecidas referentes al uso del equipamiento y funcionamiento general del mismo.

 

Se podrá reservar un máximo de 2 h por un mismo usuario. Si no se van a emplear las horas reservadas hay que anularlas, al menos con 1 hora de antelación.

 - El criostato 1950, localizado en el B-39,podrá ser utilizado, además de por el Servicio, por usuarios autorizados y bajo la supervisión del personal del Servicio.Los usuarios autorizados, son aquellos que la responsable acredite que tienen experiencia suficiente en el manejo de ese equipo para su uso. A algunos usuarios, se les autorizará a usar el criostato fuera del horario del Servicio.

 

- Si existe cualquier duda, problema o fallo de funcionamiento del equipo deberá ser comunicado con la mayor brevedad posible al responsable del servicio a través de la página de incidencias (Cyberlar- Incidencias-Histología)o telefónicamente.

 

Normas de entrega de muestras.

 - El usuario deberá rellenar la hoja de solicitud de servicio que se obtiene vía intranet/compras/histología y entregarla impresa junto con las muestras.

- Para facturaciones con cuentas externas  el usuario deberá poner,rellenar la solicitud correspondiente y entregarla en el servicio junto con las muestras.

 

- Las muestras deben estar rotuladas de forma clara indicando el nombre del investigador principal o laboratorio y numeradas con el código propio.Rotular los casettes con lápiz.

 

 

1. Preparación de bloques de parafina.

 

- Las muestras deberán ser fijadas en paraformaldehído 4% o formaldehído
(según criterio del investigador) con un volumen 20 veces mayor que la muestra. Las muestras deberán tener un tamaño apróximado de 1 cm3.


Permanecerán con el fijador toda la noche a 4º o 1-2 h temperatura ambiente. El tiempo de fijación dependerá de la procedencia y tamaño de la muestra.

 

- Si se va a tardar más de 24 horas en entregar la muestra, realizar lavados en PBS 1x 30 min ( 2-3 veces) y reservar a 4º hasta su entrega.

 

- Reflejar en la incidencia cuánto tiempo lleva con el fijador o si se entrega en PBS1x o en etanol 70%.

 

 

2. Preparación de bloques de OCT.

 

Los bloques de OCT se pueden preparar con fijación o sin fijación.

 

- Si las muestras no son fijadas, la congelación se realiza con N2 líquido en el lugar de la autopsia

 

- Para la realización de bloques de OCT por el servicio, las muestras se fijan en paraformaldehído 4% y después deben pasar por  sacarosa al 30% (en PBS 1x) como mínimo O/N. Se podrá entregar tanto en el fijador como en la sacarosa.

 

 

3. Secciones en parafina y congelados.

 

Adicionalmente se pueden entregar  los bloques de parafina, de OCT o de gelatina para su procesamiento posterior.

 

Tarifas (junio 2017)

Técnica T.Interna IIBm Interna de centro mixto y otros centros CSIC AGE,OPIs y Universidades Externos Proyectos Europeos
Preparar bloque de parafina (1U=1 bloque) 3.85 4.52 7.09 7.77 5.2
Bloque de parafina+ descalñcificación 4.88 5.72 8.43 9.23 6.23
Cortar parafina 10p 5.09 5.98 32.86 35.99 25.32
Cortar parafina 5p 3.39 3.98 19.71 21.59 15.19
Cortar parafina para extracción RNA 2.33 2.73 4.12 4.51 3.18
Preparar bloque de OCT (1U=1 bloque) 1.26 1.48 3.46 3.79 2.67
Cortar bloque de congelado 10p 4.71 5.52 37.14 40.68 24.86
Cortar bloque congelado 5p 3.32 3.89 22.41 24.54 15.08
Cortar bloque para flotación ( 1U= 1 bloque) 2.47 2.90 46.31 50.72 30.45
Contrastar y montar parafina HE/E 10p 5.2 6.1 40.29 44.13 30.42
Contrastar y montar parafina HE/E 5p 3.56 4.18 34.88 38.21 26.61
Contrastar y montar parafina Nisl 10p 5.89 6.91 40.46 44.31 30.56
Contrastar y montar parafina Nissl 5p 3.38 3.97 34.29 37.55 26.15
Contrastar y montar congelado HE/E 10p 3.27 3.84 30.49 33.39 23
Contrastar y montar congelado HE/E 5p 1.95 2.29 19.67 21.55 15
Contrastar y montar congelado Nissl 10p 5.02 5.89 32.04 35.09 24.21
Contrastar y montar congelado Nissl 5p 2.72 3.19 19.94 21.84 15.22
Contrastar y montar congelado ORO/HE 10p 3.59 4.21 29.45 32.26 22.23

 

Normas de uso de los criostatos 1900 y 1950

 

A.Normas generales de acceso y reserva

 

  • Sólo las personas autorizadas y con experiencia previa en estos equipos podrán utilizarlos. Los problemas ocasionados por su mal uso serán responsabilidad del usuario y en última instancia del investigador principal.
  • Para hacer un uso adecuado de los equipos, los usuarios sin experiencia previa deberán contactar con la responsable del Servicio.
  • Sólo se podrán reservar 2 horas por usuario. En el caso de que quede alguna hora libre, se podrán utilizar reservándose previamente.
  • Se controlará el acceso a la sala de instrumentación donde se encuentran los criostatos. Para tener acceso a la misma, se debe pedir la llave en recepción y rellenar el cuaderno correspondiente ( usuario, laboratorio, hora de entrada y salida, incidencias). El usuario se hace responsable de cerrar la sala y de la devolución de la llave a recepción tras la finalizar el uso.
  • El material de limpieza  y accesorio( etanol, pinceles, cuchillas,OCT,portas) debe ser traído por cada usuario.
  • Es obligatorio hacer la reserva. Si no se va a utilizar la reserva, será preciso anularla con al menos 1 hora de antelación y avisar mediante e-mail para al resto de los usuarios. La reserva se realizar vía intranet.

 

B. Normas generales del uso del criostato

 

-     BLOQUEAR la manivela cada vez que se coloca la muestra o se mueve. Al finalizar el trabajo volver a bloquearla.

  • Antes de empezar a cortar recordar desbloquear la manivela y no forzarla estando con el freno.
  • NO TOCAR el botón de nieve descongelándose.
  • NO CAMBIAR el ángulo del portacuchillas. Recomendado entre la posición 3-5.
  • Asegurarse de que el anti-roll esté bien colocado para evitar fricción durante el corte (placa anti-roll sobresale demasiado del filo de la cuchilla)ya que puede dañarse la placa anti-roll. Evitar rallar la placa.
  •  Para evitar vibraciones que pueden variar el grosor del corte:

                -   Apretar bien los tornillos para ajustar la muestra y para orientarla.

               -    Observar que estén bien apretadas las 2 palancas de sujeción para mover el portacuchillas y la palanca para ajustar la cuchilla.

                -   El portacuchillas no debe estar muy fuera ( por lo menos a 1cm del borde exterior). Al comenzar a trabajar hay que adelantar el portacuchillas lo máximo posible a la muestra y no al revés ( mover el brazo y acercar el brazo a la cuchilla)

- Si cuando estas cortando observas demasiado hacia fuera el brazo, échalo hacia atrás y acerca el portacuchillas.

 

  • Al finalizar el trabajo:

 

  • Quitar la cuchilla
  • Si se ha quitado la placa anti-roll, volver  a colocarla en su sitio.
  • Dejar el brazo echado hacia atrás hasta el tope y BLOQUEADO.
  • Limpiar con ETANOL 70% ( nunca con agua)los restos que hayan podido quedar en las bandejas o dentro de la cámara.
  • Colocar los discos portamuestras en su sitio y limpiar los restos con etanol.
  • Dejar cerrada la puerta de vidrio de la cámara del criostato
  • Si se ha cambiado la temperatura volver a poner la que te encontrastes.
  • Apagar la luz de la cámara.
  • Si eres el último usuario, desconecta la refrigeración del portamuestras.

NOTA: Si mantienes pulsada la tecla "Llave" durante más de 5 segundos se bloqueará el equipo. La señal que está bloqueado es que desaparecen los : en medio de los datos de hora/min en el panel del reloj. Para desbloquear se vuelve  a mantener apretada  la tecla " Llave" durante 5 segundos hasta que vuelven a aparecer los : en el panel del reloj.

  •  No apagar la refrigeración de la cámara.
  • No dejar material sobre las poyatas.
  • No apagar el nunca el aire acondicionado ni variar la temperatura.
  • Cerrar la puerta con llave y devolverla a recepción

 

      -   La responsabilidad última de la pérdida de material o un mal uso del equipo,  será del último usuario registrado antes de la incidencia  En el caso de problemas con el equipo contactar rápidamente con la responsable, Yolanda Ortega (yortega@iib.uam.es,  tel.91- 48722728).

 

 

C. Normas especificas del criostato 1900

 

   

  • Para encender/ apagar la refrigeración del portamuestras  pulsa subsiguientemente la tecla   + o– del panel de mandos para la refrigeración de la muestra y la tecla ´Llave´ hasta que aparezcan 2 puntos delante del número de dicho panel.
  • Para ajustar correctamente el portacuchillas, la palanca de sujeción que mueve el portacuchillas hacia delante debe apretarse 2 veces

 

D. Normas especificas del criostato 1950 (B-39)

 

  •    Sólo pueden usarlo los usuarios autorizados por Histología. Para utilizarlo por la tarde será necesario pasar una supervisión previa dentro del horario del Servicio.

 

  • Para encender la refrigeración del portamuestras  pulsa subsiguientemente la tecla   + del panel de mandos para la refrigeración de la muestra y la tecla ´Llave´ hasta que se enciendan los números de este panel.

 

  • Para apagar la refrigeración del portamuestras  pulsa subsiguientemente la tecla   – del panel de mandos para la refrigeración de la muestra y la tecla ´Llave´ hasta que se apaguen los números del panel del portamuestras.

 

 -   Si no hay ningún usuario reservado después de tí, sube la temperatura de la cámara a

-15º cuando termines.

 

- Si has usado el microscopio recuerda apagarlo y taparlo.